科諾賽生物淺談蛋白A親和層析
蛋白A親和層析介質(zhì)的性能參數(shù)測(cè)定方法多種多樣,以動(dòng)態(tài)載量測(cè)定方法為例,一種是將介質(zhì)裝柱并連在層析儀上,平衡,上樣抗體,待流出液濃度與上樣濃度相等時(shí)上樣結(jié)束,依次經(jīng)淋洗、洗脫,收集洗脫液,測(cè)定洗脫液體積及洗脫液濃度,計(jì)算洗脫載量。另一種則是將介質(zhì)裝柱并連接到層析儀上,平衡、上樣抗體,根據(jù)穿透曲線(xiàn),以5%穿透處介質(zhì)對(duì)抗體的吸附量進(jìn)行載量計(jì)算。還有則是在第二種方法的基礎(chǔ)上按照10%穿透處介質(zhì)對(duì)抗體的吸附量進(jìn)行載量計(jì)算。這三種方法測(cè)定同一介質(zhì)樣品得到的結(jié)果均有明顯差異。由于測(cè)定方法不同產(chǎn)生的類(lèi)似問(wèn)題也出現(xiàn)在其他參數(shù)測(cè)定上。這些差異對(duì)于介質(zhì)的應(yīng)用存在諸多不便。因此,制定了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《蛋白A親和層析介質(zhì)》(GB/T 38172-2019)