一文讀懂 His標(biāo)簽蛋白純化
His標(biāo)簽蛋白，大家應(yīng)該都很熟悉了，它是比較常見的蛋白表達(dá)方式，可以用金屬螯合層析（即IMAC）法來進(jìn)行分離純化，它具有的優(yōu)點(diǎn)是表達(dá)方便而且基本不影響蛋白的活性。
了解一下IMAC
金屬螯合層析（即IMAC）是一種新型的應(yīng)用于原核蛋白純化的技術(shù)，此方法是通過蛋白質(zhì)表面一些特殊的氨基酸，與金屬離子發(fā)生相互作用，從而對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行親和純化。金屬螯合層析法可用于多組氨酸親和標(biāo)簽蛋白的快速純化，在一個(gè)純化步驟中可實(shí)現(xiàn) 100 倍的富集，甚至可以以高產(chǎn)率獲得高達(dá) 95% 的親和標(biāo)簽蛋白純度。
His標(biāo)簽的過人之處
His標(biāo)簽（His-Tag）由6-10個(gè)組氨酸殘基組成，分子量小，不到0.84KD，通常插入在目的蛋白的C末端或N末端，不影響目標(biāo)蛋白的結(jié)構(gòu)和功能且能在變性條件下進(jìn)行純化，加之其價(jià)格便宜，是目前蛋白分離純化中最受歡迎且最有效的的選擇之一。
His標(biāo)簽（His-Tag）可與多種金屬離子發(fā)生特殊的相互作用，如Ca2+、Mg2+、Ni2+、Cu2+，F(xiàn)e3+等，其原理是利用蛋白質(zhì)表面的特性，使之被吸附在凝膠柱上，從而達(dá)到分離純化蛋白的目的。
His標(biāo)簽（His-Tag）蛋白純化完之后可以不需切除此標(biāo)簽， 且純化的條件溫和，不會(huì)對(duì)蛋白產(chǎn)生功能影響。
His標(biāo)簽蛋白純化填料的選擇
Ni-NTA/IDA ChromroseTM 6FF是科諾賽生物研發(fā)生產(chǎn)的Ni親和填料，以高流速瓊脂糖為基質(zhì)，以次氮基三乙酸（NTA）或亞氨基二乙酸（IDA）為配基，并螯合金屬離子Ni2+而形成的一種親和層析介質(zhì)，廣泛用于His標(biāo)簽蛋白等生物分子的分離純化。
Ni-NTA/IDA ChromroseTM 6FF主要特點(diǎn)：
吸附容量大、選擇性好、分辨率高；
超低限度的Ni2+泄露, 易于再生、成本低；
穩(wěn)定性、生物/溶劑相容性優(yōu)異，有利于保持產(chǎn)品的生物活性和提高產(chǎn)品收率及擴(kuò)大層析操作條件的選擇范圍。
科諾賽生物為您提供的服務(wù)：
（1）按客戶需求提供各種用于分離純化的層析介質(zhì)及層析預(yù)裝柱
（2）接受客戶委托開發(fā)各種用于分離純化的層析介質(zhì)及工藝技術(shù)
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