gM純化不再難，超大孔介質(zhì)來幫忙
有著先鋒免疫作用的IgM抗體，廣泛應(yīng)用于疾病感染的預(yù)防、早期診斷及治療。然而，獲得高純度的IgM抗體是我們必須要解決的首要問題。具有大孔優(yōu)勢的層析介質(zhì)對于純化有著“巨球蛋白”稱號的IgM，是個值得嘗試的選擇。
巨球蛋白IgM的獨(dú)到之處
免疫球蛋白根據(jù)其重鏈的抗原性不同，分為五類：IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。其中IgM是迄今為止，實(shí)際發(fā)現(xiàn)的在人體循環(huán)系統(tǒng)中最大的抗體，通常以五聚體或六聚體的形式存在，分子量分別約為900 kDa或1050 kDa，其優(yōu)點(diǎn)如下：
》由于IgM抗體存在于血液和淋巴液中，通常是感染后首先出現(xiàn)的第一抗體，IgM抗體生成后可以起到先鋒免疫作用，同時可以激活補(bǔ)體和提高自身免疫調(diào)理，對于清除體內(nèi)的病毒和微生物也有一定作用。
》相比IgG的2個臂，IgM有10個臂可與靶抗原結(jié)合，具有更高的親和力。
》相關(guān)資料顯示，在診斷自身免疫疾病和某些癌癥方面，IgM可能比IgG更有效，國外已有公司專門致力于將IgG轉(zhuǎn)化為IgM結(jié)構(gòu)以提高親和力以創(chuàng)造出雙特性抗體的研究。
IgM純化有難度
IgM抗體在純化方面較成熟的IgG抗體有一定的難度。
對于抗體純化，親和層析是最好的純化方法，但是，人IgM可以采用具有廣譜Ig結(jié)合能力的Protein L，而其他種屬來源的IgM，與Protein L沒有結(jié)合位點(diǎn)，商品化少且成本高。
目前市場上已有的純化方法包括酸銨沉淀、凝膠過濾、親和層析、離子交換等，這些方法大都采用普通的層析介質(zhì)，或多或少都會有一些局限性。由于IgM分子量巨大，普通的瓊脂糖微球和聚合物微球孔徑較小，抗體不能進(jìn)入微球孔道內(nèi)部導(dǎo)致結(jié)合載量極其低，同時狹窄的孔徑會導(dǎo)致抗體以擴(kuò)散的方式通過，穿質(zhì)速率慢，處理量低，分離時間長，不易維持IgM的穩(wěn)定性，而且普通的瓊脂糖微球和聚合物微球耐壓性有限，不利于裝出高柱效。
由此可見，在純化IgM的工藝上需要有更全面的考量。
IgM純化不再難
能夠解決難點(diǎn)、痛點(diǎn)的產(chǎn)品，才是市場最大的需求?？浦Z賽聚焦當(dāng)前IgM純化的難點(diǎn)痛點(diǎn)，不斷地探索，結(jié)合自有的超大孔技術(shù)，獨(dú)辟蹊徑，推出了高效的IgM純化解決方案。
方案一、親和法
第①步 親和層析純化：
使用Protein L Sup-porousd超大孔親和層析介質(zhì)，捕獲IgM。
第②步 離子交換層析純化：
使用MoSphere? 50V Q超大孔陰離子交換層析介質(zhì)，吸附IgM，去除痕量雜質(zhì)。
方案二、排阻法
第①步 復(fù)合模式層析純化：
使用AdMix Chromrose? FF（陰離子交換與疏水雙重功能）復(fù)合模式層析介質(zhì)，吸附宿主細(xì)胞雜質(zhì)，IgM分子量大，排阻在外直接流穿。
第②步 離子交換層析純化：
使用MoSphere? 50V Q超大孔陰離子交換層析介質(zhì)，吸附IgM。
當(dāng)然，IgM抗體純化的方案不只以上這兩種，下游純化是一個錯綜復(fù)雜的過程，因地制宜的根據(jù)發(fā)酵液情況調(diào)整純化方案是最明智的選擇。親和法和排阻法適用于重組表達(dá)的IgM抗體，對于腹水和血清抗體，由于其抗體亞型較多，則需要針對性地設(shè)計(jì)純化方案。相對于進(jìn)口的標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品，科諾賽更傾向于靈活的根據(jù)市場需求，定制客戶需要的產(chǎn)品和方案。
不同應(yīng)用場景的多孔徑設(shè)計(jì)
層析介質(zhì)的配基與目標(biāo)物的作用基本發(fā)生在層析介質(zhì)顆粒內(nèi)部，精確的孔徑設(shè)計(jì)對純化至關(guān)重要。科諾賽根據(jù)客戶不同的應(yīng)用場景，開發(fā)出不同粒徑、孔徑大小的大孔聚合物離子交換層析介質(zhì)，滿足用戶的應(yīng)用需求。
科諾賽大孔離子交換層析介質(zhì)的優(yōu)勢：
》蛋白活性高：
超大孔徑的設(shè)計(jì)可明顯減弱蛋白質(zhì)的去折疊程度，提高了蛋白活性；
》非特異性吸附低：
微球表面進(jìn)行親水化改性后鍵合離子交換基團(tuán)，非特異性吸附低，機(jī)械化程度高；
》高流速、高載量：
超大孔徑通透性更好，分子傳質(zhì)速度快，可在高流速狀態(tài)下保持更高的載量，載量提高10倍以上；
》高穩(wěn)定、高回收率：
超大孔徑顯著提高生物分子在層析介質(zhì)上吸附的熱穩(wěn)定性，具有更高的收率。
后發(fā)先至，國內(nèi)唯一
進(jìn)口品牌壟斷層析填料市場幾十年，是疫情給了國產(chǎn)品牌一個機(jī)會。科諾賽在疫情最肆虐的時候誕生，團(tuán)隊(duì)成員沒有“海歸博士”，沒有“美國綠卡”，也沒有“歐美永久居留權(quán)”，是地道的“土鱉”團(tuán)隊(duì)。這個“土鱉”團(tuán)隊(duì)基于對產(chǎn)業(yè)的熱情、對市場的深度理解，從“做別人有的產(chǎn)品”開始，深度發(fā)掘市場需求，根據(jù)市場需求逐漸“做別人沒有的產(chǎn)品”。
質(zhì)粒、AAV病毒載體、LV病毒載體、溶瘤病毒、流感病毒、IgM抗體、IgA抗體、mRNA疫苗、多糖結(jié)合疫苗等生物分子由于其體量巨大至今沒有很好的純化方案?？浦Z賽團(tuán)隊(duì)針對這個市場痛點(diǎn)，開發(fā)出了新型的超大孔層析介質(zhì)。
超大孔制球技術(shù)早有科學(xué)家建立了理論基礎(chǔ)，但是因?yàn)椤翱状笠姿榍颉钡脑蛞恢睕]有商業(yè)化生產(chǎn)。
科諾賽生物自成立以來，一直秉持“以客戶為中心，以市場為導(dǎo)向”的研發(fā)服務(wù)方針，針對客戶在純化階段的難點(diǎn)痛點(diǎn)，不斷地尋找最佳的解決方案，通過近三年來的不懈努力，刻苦攻關(guān)，千錘百煉，不斷打磨，終于突破技術(shù)瓶頸獲得成功，是目前國內(nèi)唯一掌握超大孔制球技術(shù)并實(shí)踐成功的企業(yè)。
下一步，科諾賽將利用超大孔技術(shù)繼續(xù)研發(fā)超大孔親和產(chǎn)品，mRNA親和、質(zhì)粒親和、AAV親和、外泌體親和，不斷補(bǔ)足國內(nèi)層析的短板，做市場需要的產(chǎn)品，更好地滿足國內(nèi)生物藥企的純化需求。
