新型鎳柱填料

在純化 His標簽實驗過程中，如何解決EDTA(螯合劑)和DTT(還原劑)的耐受問題，避免金屬離子脫落？

His標簽蛋白純化通常采用固定化金屬離子親和層析（IMAC）純化的方法，主要利用介質(zhì)配體螯合的金屬離子吸附純化表面帶組氨酸殘基的蛋白。Ni2+、Co2+和Cu2+是His標簽蛋白純化中使用較為廣泛的金屬離子，因為它們在水溶液中與組氨酸具有較好的親和性。其中，Ni2+是親和純化實驗中最常使用的，Ni2+在瓊脂糖上的螯合形式多樣，不同的螯合結(jié)構(gòu)，決定了Ni2+在層析介質(zhì)上的穩(wěn)定性和結(jié)合能力。傳統(tǒng)的His標簽蛋白純化介質(zhì)最常用兩種配基：次氮基三乙酸(NTA)和亞氨基二乙酸（IDA），通常情況下都是比較穩(wěn)定的。

在細胞培養(yǎng)，尤其是酵母、CHO、昆蟲桿狀病毒等真核分泌表達過程中，通常會加入EDTA和DTT，如果使用傳統(tǒng)的His標簽蛋白純化介質(zhì)，會導(dǎo)致金屬離子有一定的脫落，所以在進行純化 His標簽實驗之前，需要提前進行緩沖液的置換來去除EDTA或者DTT，過程繁冗復(fù)雜，而且會降低蛋白的活性。

為了解決EDTA和DTT的耐受問題，避免金屬離子脫落，科諾賽生物研發(fā)生產(chǎn)出了新型His標簽蛋白純化層析介質(zhì)產(chǎn)品：Ni-TED Chromrose?FF鎳親和層析介質(zhì)，此產(chǎn)品強力的螯合配基TED與Ni2+形成5個螯合位點（和EDTA與Ni的螯合類似），使Ni2+異常穩(wěn)定，其螯合后的藍色也更深。

產(chǎn)品特點：

》最高耐受100mM EDTA和10mM DTT，無需進行樣品前處理，簡化實驗流程，保護蛋白活性；

》螯合Ni2+離子非常牢固，幾乎零脫落；

》清洗再生步驟簡單，無需脫鎳直接進行NaOH清洗；

》高動態(tài)結(jié)合載量28mgHis標簽蛋白/mL介質(zhì)。

產(chǎn)品參數(shù)：

訂貨信息：