層析工藝的種類和層析介質(zhì)的選擇

柱層析是色譜法中應(yīng)用比較廣泛的一種分離提純方法，其在工業(yè)生產(chǎn)中已經(jīng)成為一個(gè)獨(dú)立的操作單元。由于被分離物質(zhì)的品種繁多、結(jié)構(gòu)各異，所以在選擇分離方法及分離介質(zhì)時(shí)要根據(jù)具體情況進(jìn)行確定，以達(dá)到最佳的經(jīng)濟(jì)效益。通常生物技術(shù)下游處理程序，可概括為三步：預(yù)處理，中級(jí)純化，精制純化。各個(gè)階段達(dá)到的目的不同，被處理的料液也不相同。

1. 預(yù)處理階段，料液量大且成分比較復(fù)雜，含有多種雜質(zhì)，目標(biāo)產(chǎn)物濃度有時(shí)會(huì)很低，所以此階段主要是對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物進(jìn)行提取、分離，達(dá)到濃縮的目的。此階段需要選擇工作容量大、抗污染、使用壽命長(zhǎng)且價(jià)格低廉的分離方法及層析介質(zhì)。

2. 中度純化，初步分離出來的物質(zhì)需要中度純化，此階段適合選擇性強(qiáng)、容量大的分離方法及層析介質(zhì)。

3. 精制純化，這階段的料液往往比較少，雜志含量也少，但是對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物的純度要求很高，必須選用高選擇性、高分辨率的分離方法和層析介質(zhì)。

層析分離方法根據(jù)其原理和特點(diǎn)不同，分類也不同，在下游處理中有較大的選擇范圍。本著達(dá)到協(xié)同的高效、快速、經(jīng)濟(jì)的目的，根據(jù)各階段的特點(diǎn)要采用不同的分離純化方法。

比如在預(yù)處理階段，樣品體積大、雜志質(zhì)含量高、黏度高、有顆粒存在，此時(shí)要求在最快的速度下處理大量樣品，所以一般采用吸附性介質(zhì)，如離子交換層析介質(zhì)和疏水層析介質(zhì)。

為得到最終高純度的目標(biāo)物，以去除少量的污染物、異構(gòu)體或多聚體為目的，可采用高分辨率高回收率的凝膠過濾層析介質(zhì)。詳細(xì)的分類可以參考下表：