如何選擇合適的肝素親和

選擇合適的重組蛋白產(chǎn)品對獲得正確的實驗結(jié)果非常重要?？梢詮囊韵聨c中進行選擇:

本公司服務范圍有肝素親和以及層析填料等， 肝素親和介質(zhì)適用于與肝素分子有特異性吸附作用的蛋白分子的分離和純化，例如：凝血因子、抗凝血酶III、生長因子、干擾素以及脂肪酶等。肝素親和介質(zhì)以瓊脂糖軟膠微球作為基質(zhì),采用惠誠生物特有的化學鍵和技術(shù)固定肝素分子,通過肝素與抗凝血酶III或具有類似結(jié)構(gòu)蛋白分子之間的特異性結(jié)合力實現(xiàn)目標蛋白的分離

　　1.蛋白來源

　　一些蛋白需要一系列翻譯后修飾才能成為活性成熟蛋白質(zhì)。細菌不能提供這樣的修飾，但哺乳動物細胞可以。因此，我們在購買時要注意蛋白質(zhì)的來源。

　　當然，除了上面提到的兩種表達系統(tǒng)之外，還有酵母和昆蟲的表達系統(tǒng)，各有優(yōu)缺點，所以一定要注意選擇重組蛋白。

　　優(yōu)勢

　　繁殖快，成本低，產(chǎn)量高;基因表達的遺傳背景和調(diào)控機制明確;易于大規(guī)模栽培，成本低。

　　使用方便，表達水平高，純化方便，經(jīng)過一定的翻譯后處理進行糖基化修飾，操作簡單，適合大規(guī)模生產(chǎn);它可以誘導表達或分泌表達，產(chǎn)品易于純化。

　　產(chǎn)量高，翻譯后處理與哺乳動物相似;它對一些有毒或難以表達的蛋白質(zhì)有優(yōu)勢;無內(nèi)毒素污染。

　　完美的翻譯后處理，活性接近天然蛋白質(zhì)。

　　缺點

　　蛋白質(zhì)通常是包涵體，很難純化。無糖糖基化(分泌蛋白，細胞膜上不可利用的蛋白)，生物活性不確定;無翻譯后修飾，內(nèi)毒素含量高。

　　有時會出現(xiàn)蛋白質(zhì)切割問題;糖基化不能滿足要求。

　　蛋白質(zhì)活性不如哺乳動物;它適用于表達位于細胞中的真核蛋白質(zhì)，如激酶。

　　周期長，技術(shù)要求高;表達量低。

　　2.物種和屬的起源

　　蛋白常見的物種來源有人源、小鼠源和大鼠源等。一般來說，不同種屬之間的蛋白質(zhì)同源性在80%以上可以視為交叉活性，可以推薦使用。

　　3.生物活性和穩(wěn)定性

　　蛋白質(zhì)的純度、內(nèi)毒素水平和批次間的穩(wěn)定性將直接影響實驗結(jié)果。所以優(yōu)質(zhì)蛋白產(chǎn)品會嚴格監(jiān)控這個環(huán)節(jié)，提供詳細的數(shù)據(jù)。同時，還應考慮蛋白質(zhì)產(chǎn)品的生物活性。

　　一般來說，只要記住以下五點:

　　大多數(shù)人類細胞因子在小鼠細胞上是活躍的。

　　許多小鼠細胞因子對人細胞也有活性，但活性低于相應的人細胞因子。

　　一些人類細胞因子(如白細胞介素-7)在小鼠細胞中顯示出比小鼠細胞因子更高的活性。

　　干擾素、粒細胞集落刺激因子、白細胞介素-3和白細胞介素-4是物種特異性的，對非人細胞幾乎沒有活性。

　　成纖維細胞生長因子和神經(jīng)營養(yǎng)因子高度保守，在其他動物細胞中也能表現(xiàn)出良好的活性。